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高通量組織研磨器處理小鼠脛骨樣品的實(shí)驗(yàn)方案

發(fā)布時間:2026-05-08 來源:新芝生物 瀏覽量:0
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  實(shí)驗(yàn)背景:小鼠脛骨是骨代謝、骨疾病、干細(xì)胞及分子生物學(xué)研究中的重要組織樣本。在 DNA、RNA 提取、蛋白定量等檢測中,需將堅(jiān)硬致密的骨組織研磨成均勻細(xì)膩的粉末,以充分釋放生物分子。然而,骨組織礦化程度高、質(zhì)地堅(jiān)硬,傳統(tǒng)研磨方式難以徹底破碎,且易因產(chǎn)熱導(dǎo)致核酸或蛋白質(zhì)降解。本實(shí)驗(yàn)采用新芝生物高通量組織研磨器 SCIENTZ?48L 對小鼠脛骨進(jìn)行干磨處理,驗(yàn)證其在常溫或低溫條件下高效破碎骨組織的能力。

傳統(tǒng)研磨方法存在的痛點(diǎn)

  組織堅(jiān)硬難破碎:骨組織礦化程度高、質(zhì)地致密堅(jiān)硬,傳統(tǒng)研缽或手動勻漿難以將其徹底破碎,常殘留骨渣,影響生物分子釋放效率。

  成分易受熱降解:研磨過程中產(chǎn)生的熱量易導(dǎo)致 RNA、蛋白質(zhì)等熱敏性生物分子降解,影響后續(xù) PCR、Western blot 等檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

  易產(chǎn)生交叉污染:傳統(tǒng)研磨工具清洗繁瑣,多批次樣品處理時易造成樣品間交叉污染,影響實(shí)驗(yàn)可靠性。

  處理效率低下:手工研磨耗時費(fèi)力,且重復(fù)性差,難以適應(yīng)高通量樣本處理需求,制約科研實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

  實(shí)驗(yàn)樣品:小鼠脛骨組織

  實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>驗(yàn)證新芝生物高通量組織研磨器 SCIENTZ?48L 對小鼠脛骨的破碎效果,確保獲得均勻細(xì)膩的骨組織粉末,滿足 DNA/RNA 提取、蛋白分析、酶活性檢測等后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的要求。

  實(shí)驗(yàn)耗材:2ml離心管、6mm研磨珠2顆,3mm研磨珠若干

  實(shí)驗(yàn)設(shè)備:

SCINETZ-70L冷凍高通量研磨儀 正

冷凍型高通量組織研磨器SCIENTZ-48L

實(shí)驗(yàn)步驟

  樣本準(zhǔn)備:取新鮮或凍存小鼠脛骨組織適量(約 50–100 mg),剔除附著軟組織后置于2 ml 離心管中。若進(jìn)行 RNA 提取,建議使用無 RNA 酶的專用離心管,并全程低溫操作。

  參數(shù)設(shè)置:研磨頻率:60Hz,單次運(yùn)行時間:60秒,循環(huán)次數(shù):6次,間歇暫停:5秒,本實(shí)驗(yàn)為干磨,無需添加任何溶劑。

  進(jìn)行研磨:將離心管裝入適配器,對稱配平后鎖緊艙門,啟動研磨程序。設(shè)備通過高頻三維振蕩帶動研磨珠高速撞擊、剪切骨組織,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞快速破碎。

  結(jié)束取樣:研磨完成后,取出離心管,即可獲得均勻細(xì)膩的骨組織粉末,無可見骨塊殘留。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

小鼠組織對比圖

左:研磨前 ; 右:研磨后

  經(jīng)高通量組織研磨器 SCIENTZ?48L處理后,小鼠脛骨由堅(jiān)硬的骨組織轉(zhuǎn)變?yōu)榫鶆蚣?xì)膩的粉末狀,破碎充分,無肉眼可見骨渣殘留。經(jīng)后續(xù)檢測,核酸完整性良好,蛋白質(zhì)提取效率顯著提升,滿足分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)要求。

注意事項(xiàng)

  01進(jìn)行 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)提取時,建議使用預(yù)冷離心管,或采用間歇循環(huán)模式,避免樣品升溫導(dǎo)致生物分子降解。

  02新鮮組織建議采集后立即處理或快速凍存,避免反復(fù)凍融影響樣品質(zhì)量。

  03裝樣量不宜過多,以不超過離心管容量 1/3 為佳,確保研磨珠運(yùn)動空間充足。

  04干磨過程務(wù)必蓋緊管蓋,防止骨粉飛濺、泄漏或交叉污染。

  05骨組織硬度較高,優(yōu)先使用氧化鋯研磨珠,提升破碎效果與耐用性。

  實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,新芝生物高通量組織研磨器 SCIENTZ?48L能夠高效處理小鼠脛骨這類堅(jiān)硬骨組織,在低溫條件下實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的充分破碎,獲得均勻細(xì)膩的粉末樣品。該方法操作簡便、重復(fù)性好、通量高,有效避免了傳統(tǒng)研磨方法中的產(chǎn)熱降解和交叉污染問題,顯著提升了生物樣品前處理的效率與質(zhì)量,適用于分子生物學(xué)、藥物研發(fā)、病理檢測及相關(guān)科研領(lǐng)域中的骨組織樣品制備環(huán)節(jié)。

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